肉的宰后嫩化注意归因于肌原合成合成玻纤结构设计设计的摧毁，肌原合成合成玻纤结构设计设计是由内源性蛋清电离酶分解肌原合成合成玻纤和人体生殖肿瘤人体肿瘤细胞骨架蛋清有的。与十几年来直到是重视突出的钙蛋清酶不一样，胱天蛋清酶（caspases）最进拥有感兴致情况下题。胱天蛋清酶在人体生殖肿瘤人体肿瘤细胞凋亡的继续执行周期起着极为重要性的用处，其中的caspase-3在去逝蛋清电离中的用处是多部分面和僵化的，为此非常值得进一点试论。S-亚硝基化能够调准钙发挥、势能肿瘤人体肿瘤细胞代谢、蛋清质分解和人体生殖肿瘤人体肿瘤细胞凋亡来调准吃起来，涉及嫩度和持水程度。事前试论发现S-亚硝基化行变动忽略线粒体的caspase-3级联的反应，这会是肌肉组织人体生殖肿瘤人体肿瘤细胞凋亡和鸡肉好品质转变 的根本原因。caspase-3的试论突出是其与人体生殖肿瘤人体肿瘤细胞凋亡的的联系，所以，太少有试论试论S-亚硝基化调准caspase-3的长效机制。

2024年9月由常州林业学校张万刚教学销售团队在期刊Journal of Agricultural and Food Chemistry发表题为“Exploring the Effects of S‑Nitrosylation on Caspase‑3 Modification and Myofibril Degradation of Beef In Vitro”文章，研究发现了GSNO处理后caspase-3的活性显著降低（P < 0.05），并表现出剂量依赖性的抑制作用，其在半胱氨酸116、170、184、220和264位点被S-亚硝基化，进一步抑制了其对牛肉肌原纤维蛋白的蛋白水解能力。拜谱生物技术为该研究提供了亚硝基化呈现组学拜谱生物，助力发现目的蛋白上的亚硝基化修饰位点。

中文字幕宝贝标题：体外研究S-亚硝基化对牛肉Caspase-3修饰和肌原纤维降解的影响

刊物：Journal of Agricultural and Food Chemistry

2025年危害细胞：5.7

发表过时候：2024年9月

老客户公司的：南京农业大学

实验的材料：蛋白

拜谱打造新技术：亚硝基化修饰组学

技术设备路线规划：

一、科研结果显示

01.Caspase-3化学活化

当今尚不很明白NO对caspase-3的促使反应有无归因于NO介导的S-亚硝基化，差异氧化还原电位梯度方向的GSNO作为一个外源性NO生产，以促进caspase-3的离体S-亚硝基化。最终结果表面，与也没有GSNO的组想必，100、200和400μM GSNO组的caspase-3渗透性相关性减轻（图1），与原先新闻报道同一。GSNO解决减轻caspase-3渗透性的意向原故仍进一步具体分析。

图1 不一浓硫酸浓度的GSNO净化处理对caspase-3吸附性的影响到

(图源：Hou, Qin et al., J Agric Food Chem.. 2024)

02.Caspase-3的S-亚硝基化数量

深入分析Caspase-3的亚硝基化地步较，以说明GSNO对Caspase-3的反响性。经GSNO治疗后，查重到caspase-3核蛋白S-亚硝基化挠度曾加（图2）。等结果显示取决于，外源性GSNO塑造可获得成功引诱caspase-3的体内S-亚硝基化。让人觉得惊喜的是，在没了GSNO有着的较组中查重到有一个变弱的S-亚硝基化带，这取决于caspase-3将再次发生内源性的S-亚硝基化。前者，本深入分析中caspase-3的S-亚硝基化地步较较高，而caspase-3的特喜欢的人削减，这与以前的深入分析一样的。以至于，caspase-3的特喜欢的人S-亚硝基化绘制位点尚不看不清楚，还需求进一大步的深入研究。

图2 GSNO处里对caspase-3S-亚硝基化平均水平的作用

(图源：Hou, Qin et al., J Agric Food Chem.. 2024)

03.Caspase-3的S-亚硝基化位点

通过亚硝基化修饰语组学检测caspase-3的S-亚硝基化位点。结果表明，caspase-3上的4个多肽中有5个半胱氨酸残基被蛋白S-亚硝基化修饰（图3）。亚硝基化半胱氨酸定位于SSFVCVLLSHGEEGIIFGTNGPVDLK,GTELDCGIETDSGVDDDMACHKIPVEADFLYAYSTAPGYYSWR,DGSWFIQSLCAMLK和KQIPCIVSMLTK的多肽中，分别位于116、170、184、220和264位。S-亚硝基化caspase-3多肽的MS1和MS2光谱显示Caspase-3是一种具有8个半胱氨酸残基的半胱氨酸蛋白酶，其中5个半胱氨酸被发现被亚硝基化，说明Caspase-3易受亚硝基化修饰（图4）。此外，据先前报道casase-3的催化残留亚硝基化Cys163，这不同于本研究的结果。S-亚硝基化caspase-3的丰度、位点的修饰水平和检测方法的灵敏度的差异可能是导致结果不一致的原因之一。可以推断，半胱氨酸蛋白酶活性的调节可能是由NO和蛋白S-亚硝基化介导的，这可能影响蛋白降解，促进死后衰老。

图 3 caspase-3的回文编码序列。颜色标识的回文编码序列说道S-亚硝基化肽，颜色标识的C说道S-亚硝基化半胱氨酸

(图源：Hou, Qin et al., JAgric Food Chem.. 2024)

图4. s-亚硝基化肽和caspase-3位点的MS1和MS2光谱仪

(图源：Hou, Qin et al., J Agric Food Chem.. 2024)

04.S-亚硝基化Caspase-3分解结蛋清

结核血清作另外一种至关主要的細胞骨架核血清，在维系肌細胞形式的形式完成性和收拢性多方面起着至关主要做用，研究分析S-亚硝基化caspase-3对结核血清可光降解的铭感性状态兼具至关主要含义。与Std（未用胱天核血清酶-3和GSNO孵育的原始肌食物黏胶纤维核血清）组相信，0 μM GSNO组（肌原食物黏胶纤维和caspase-3的孵育，无GSNO）的完成结核血清含锌量同质性降底，温馨提示caspase-3对结核血清兼具未知的核血清溶解工作能力。在GSNO孵育后，完成结核血清的含锌量比较突出上升（P < 0.05）。显然，当GSNO有机废气浓度变高时，完成结核血清的含锌量持续时间调整（P < 0.05）（图5）。某些发觉得出结论，SNO淡化的caspase-3以含量根据的方法限制结核血清的可光降解。

图5.S-亚硝基化caspase-3降解塑料结蛋白质

(图源：Hou, Qin et al., J Agric Food Chem.. 2024)

05.S-亚硝基化Caspase- 3降解塑料肌钙蛋白质-T

肌钙蛋清-T (TnT)是原肌球蛋清调准承担脂肪内缩的丝条的有必须肌原氯纶蛋清。TnT的生物光分解表现是论文检测工具到28和30 kDa的TnT。在亚硝基化因素下，caspase-3对TnT的生物光分解症状如下图6如图所示，与Std组（不含有caspase-3和GSNO的肌原氯纶）优于，caspase-3组中30 kDa TnT段落有效增多，得出结论caspase-3参入了TnT的生物光分解，不仅而且，caspase-3与GSNO的孵育致使30 kDa TnT减低。在100和200 μM GSNO组彼此没得论文检测工具到特殊的的一定的差异(P > 0.05)，而当GSNO的溶液浓度完成400 μM 时，该段落有效提高(P < 0.05)。这样的挖掘得出结论了SNO遮盖的caspase-3对TnT生物光分解的调控的功效。结蛋清和TnT是caspase-3的强烈底物，而GSNO进行处理下降caspase-3的渗透性应该致使肌原氯纶蛋清生物光分解度下降。总而言之归结，NO引诱的S-亚硝基化可不可以进行遮盖半胱氨酸残基来调准caspase-3的渗透性，而能进步反应其对结蛋清和TnT的蛋清蛋白质水解学习能力，关键在于反应鸡肉产品。

图6. S-亚硝基化caspase- 3挥发肌钙球蛋白-T

(图源：Hou, Qin et al., J Agric Food Chem.. 2024)

二、个人总结

本科研意在论述S-亚硝基化对caspase-3突显的影向还有然后对羊肉肌原植物纤维材料身体外挥发的影向。球蛋清S-亚硝基化行突显caspase-3的半胱氨酸残基，最后造成 caspase-3活性氧减小，进一大步促使了其对羊肉肌原植物纤维材料球蛋清的球蛋清蛋白质水解作用。

三、拜谱总结ppt

深入分享采取了酶活法测，亚硝基化遮盖组学分享，WB等判断方式方法，看见淀粉酶质S-亚硝基化能够遮盖caspase-3的半胱氨酸残基，这出现了caspase-3渗透性的拉低，齐头并进一步骤阻止了其对羊肉肌原仟维淀粉酶质的淀粉酶质油脂水解程度。本深入分享为讲解淀粉酶质质亚硝基化对肉嫩的调整共识机制给予了一大个新的画面。

拜谱生物作为一家国内领先的多组学服务公司，可提供完善成熟的血清质组学、呈现血清质组学、代谢率组学、转录组学等多组学产品技术服务体系，整合多组学数据进行深入挖掘分析，全面解析机制机理等，助力高分文章发表。除此之外，拜谱生物还可提供半胱氨酸全系列的，包括亚硝基化、谷胱甘肽化、硫巯基化、次磺过酸、total氧化反应完美重现、游离态巯基，欢迎大家咨询！

选取专著：

Qin Hou, Chao Ma, Rui Liu, Zhuangli Kang, and Wangang Zhang.Exploring the Effects of S-Nitrosylation on Caspase-3 Modification and Myofibril Degradation of Beef In Vitro. Journal of Agricultural and Food Chemistry. doi.org/10.1021/acs.jafc.4c06663